ELISA pro syfilis: metoda analýzy, dešifrování příčin falešně pozitivních výsledků

Napájení

Seznam standardních diagnostických opatření používaných pro infekční onemocnění zahrnuje enzymovou imunologickou zkoušku. Pokud je IFA pro syfilis pozitivní, okamžitě se nepokládejte.

Uvažujme podrobněji rysy této metodologie výzkumu a principy rozluštění výsledků získaných u různých kategorií pacientů.

Podstata studie

Imunoenzymatická analýza je jednou z nejběžnějších metod diagnostiky infekčních onemocnění. Patří do kategorie treponemálních testů, tj. S pomocí je možné zjistit přítomnost příčinného činitele syfilis - bledého treponému v těle pacienta.

Metodou ELISA je detekce syfilis detekcí protilátek proti treponému. Jsou obsaženy v krvi pacienta a jejich druh a množství závisí na stupni a formě onemocnění, což umožňuje získat důležité informace o současném stavu lidského zdraví.

Tato metoda se také používá k diagnostice dalších pohlavních a infekčních onemocnění, zejména autoimunitních, parazitních, systémových a tak dále.

Výhody a nevýhody

ELISA je často předepsána pro podezření na syfilis nebo jiné infekční nemoci. To je způsobeno tím, že analýza může určit přesný typ a stupeň onemocnění a jeho spolehlivost je udržována na vysoké úrovni - pravděpodobnost chyby pro výsledků několika studií je pouze 1%, primární IFA s přesností 90%.

Použití kvalitních činidel a moderního vybavení umožňuje maximalizovat přesnost indikátorů.

Obecně platí, že výhody této metody jsou:

  1. Vysoká přesnost výsledku. Pravděpodobnost získání nepravdivých údajů je velmi malá.
  2. Minimalizace lidského vlivu. Moderní zařízení pro provádění testu ELISA vylučuje vliv osoby na výsledky výzkumu kvůli automatizaci procesu.
  3. Identifikace specifických protilátek. Je nemožné zmást antigeny jednoho druhu s jinými, proto analýza ukazuje přesný výsledek konkrétní diagnózy.
  4. Stanovení nejmenších odchylek od normy. Dokonce i nejzávažnější koncentrace patologických činitelů nezůstane bez pozornosti.

Nezapomeňte na slabiny této metody. IFA má následující nevýhody:

  1. Vysoká cena. Vysoké náklady jsou způsobeny mnoha faktory, zejména potřeba dobrého vybavení, kvalitních činidel a odborníků s dostatečnou úrovní školení.
  2. Potřeba předběžné diagnózy. Je třeba vědět, které antigeny hledat, protože bez dalších údajů není možné provést přesnou diagnózu.
  3. Pravděpodobnost falešně pozitivního výsledku. Některé tělesné stavy a další faktory mohou zkreslovat konečná data.

Indikace pro vedení

Lékař může předepsat enzymovou imunoanalýzu pro diagnózu nejen syfilisu, ale i řady dalších infekčních onemocnění.

Pokud zvážíme situaci přímo s infekcí treponemem, důvodem průzkumu může být:

  • výskyt vnějších symptomů onemocnění (chancre, syfilitida, guma atd.);
  • významné snížení imunity;
  • detekce nebo podezření na syfilis u sexuálního partnera, příbuzných a rodinných příslušníků;
  • pozitivní reakce v jiných testech;
  • identifikace dalších onemocnění, které mohou být spojeny se syfilisem;
  • osobní přání osoby, která má být vyšetřena.

Metody vedení

ELISA může být provedena různými způsoby. V každém konkrétním případě je vybrána nejvhodnější varianta.

Nejprve je rozdělení metod na:

  1. Kvalita. V těle pacienta je infekce nebo virus.
  2. Kvantitativní. Určuje koncentraci protilátek proti patogennímu činidlu v lidském těle, což udává stupeň a intenzitu onemocnění.

Existuje také klasifikace metod ELISA podle principu reprodukce nezbytné reakce.

K dispozici jsou 3 možnosti:

  1. Přímý. Označené protilátky se zavádějí do dodaných krevních vzorků.
  2. Nepřímé s antigeny. Dříve byly sorbedové antigeny umístěny do buněk z polystyrenových destiček pro test ELISA. Pak se k nim přidávají protilátky z virů, což vyvolává tvorbu imunních komplexů nezbytných pro další vyhodnocení výsledků.
  3. Nepřímé s protilátkami. Pro pohlavní choroby se tato metoda často používá. Zahrnuje předběžnou sorpci protilátek, teprve potom se do destičky přidávají antigeny.

Pravidla příjmu materiálu

Aby se snížilo riziko získání nespolehlivých výsledků, je nezbytné řádně dodat krev pro analýzu.

Před absolvováním testu ELISA musíte dodržovat některá omezení:

  • vyhnout se intenzivnímu fyzickému a emočnímu stresu;
  • zdržet se kouření a konzumace alkoholu po dobu nejméně 1 až 3 dnů;
  • po několik dní musíte přejít na správnou výživu;
  • doporučuje se ženám kontrolovat fázi menstruačního cyklu, protože hormony mohou výsledky deformovat;
  • poslední jídlo by mělo být 8 až 10 hodin před odběrem krve;
  • Po dobu 10 dnů je léčba vyloučena, což může ovlivnit výsledky studie.

U IFA se užívá žilní krve z ulnární žíly, je třeba je užít ráno na prázdném žaludku. Obvykle se používají standardní pravidla pro přípravu na odběr žilní krve. V závislosti na přítomnosti choroby, která je testována, mohou být zavedeny další požadavky na přípravu pacienta.

Způsob vedení

Pokyny pro provádění testu ELISA jsou poměrně jednoduché:

  1. Pacient vezme krev z žíly.
  2. Získaný materiál se připraví a rozdělí na vzorky na speciální paletě jemného oka.
  3. Antigeny jsou smíchány s protilátkami podle zvoleného způsobu.
  4. Reakce se hodnotí. Vzorky jsou porovnávány s kontrolními vzorky, provádí se kvalitativní a kvantitativní vyhodnocení výsledků.
  5. Data jsou zaznamenána ve zvláštní tabulce s použitím kvantitativních indikátorů (celkové protilátky).
  6. Léčivý lékař rozluštil výsledky. V případě potřeby je předepsána vhodná léčba.

Po provedení výzkumů pro pacienta je vydán dokument s výsledky. Má formu tabulky s příslušnými označeními proti každému typu imunoglobulinu v průsečíku s názvem infekčních onemocnění.

Vysvětlení

Pouze odborník může inteligentně dešifrovat výsledky testů. Pro mne je těžké pochopit, jaký je výsledek IFA = 1. 4. Syfilis se může také odehrávat v různých formách, což ovlivňuje také konečná data.

Výsledky ukazují 3 typy imunoglobulinů:

  1. IgM. Umožňuje stanovit termín infekce syfilisem. Pozitivní výsledek naznačuje exacerbaci onemocnění. Jejich nepřítomnost může naznačovat remisi chronických patologií nebo latentní formu onemocnění.
  2. IgA. Označuje chorobu od okamžiku infekce, která uplynulo více než měsíc. Je to také známka akutní fáze onemocnění, a to jak s normální patologií, tak i s chronickými zanedbanými.
  3. IgG. Je to známka špičkového období onemocnění, tedy jeho zhoršení. Při syfilisu se po léčbě objeví pozitivní reakce. U některých typů onemocnění může být známkou rozvinuté imunity.

Tyto látky jsou tvořeny tělem v určité sekvenci, což je další příznak onemocnění. Při kvalitativních testech je stanovena pouze přítomnost imunoglobulinů v krvi každého typu.

To se odráží ve změně barvy materiálů použitých při analýze. Kvantitativní ukazatele jsou pomocné, přesněji popisují situaci. Poměr antigenů a protilátek označuje závažnost onemocnění a intenzitu odezvy těla.

Co dělat

Pokud má pacient syfilis, je vždy zjištěna pozitivní ELISA a v takovém studiu není možné pozorovat přítomnost treponemů. Nezoufejte, nemoc je dobře léčitelná, zejména v počátečních fázích.

Co musíte udělat s výsledky pozitivních testů:

  • podle lékařského testu provést další testy;
  • projít průběhem antibiotické terapie podle zvoleného schématu;
  • přímé úsilí o posílení imunity;
  • hlásit onemocnění vašemu sexuálnímu partnerovi;
  • v budoucnosti pravidelně podstupují preventivní diagnostiku až do vyřazení z registru v lékárně (po pěti letech bez výsledků pozitivních testů).

Není nutné odkládat ošetřovatelskou péči na nemocniční seznam a obávat se zveřejnění výsledků. Diagnóza je šifrována a zůstává tajemstvím, pouze pokud existuje hrozba infekce jiných lidí, je nutné hlásit problém příbuzným a sexuálním partnerům, aby prošli požadovanými vyšetřeními.

Falešný pozitivní výsledek a jeho příčiny

Někdy je výsledek jiných testů a IFA falešně pozitivní pro syfilis. Proto se doporučuje provést 2 - 3 pomocné metody a po chvíli opakovat enzymový imunotest.

Takové nepřesnosti jsou vzácné, jsou způsobeny hlavně těmito faktory:

  • těhotenství;
  • chronické nemoci;
  • nedávné očkování;
  • zranění.

Falešně pozitivní výsledky jsou rozděleny na akutní a chronické, v závislosti na povaze faktoru, který je vyvolával.

ELISA-diagnostika: jaká je podstata, definice protilátek, jak provádět a v jakých nemocech je účinná?

ELISA (ELISA - angličtina) vstoupila do života praktické medicíny ještě někde v 60. letech minulého století. Jeho původním úkolem byl histologický výzkum pro vědecké účely, který vyústil v hledání a identifikaci antigenní struktury buněk živého organismu.

Metoda ELISA je založena na interakci specifických protilátek (AT) a příbuzných antigenů (AH) s tvorbou komplexu "antigen-protilátka", který je detekován enzymem. Tato skutečnost vedla vědce k myšlence, že tato metoda může být použita pro diagnostické účely k identifikaci specifických imunoglobulinů různých tříd zapojených do imunitní odpovědi na určitou infekci. A byl to průlom v klinické laboratorní diagnostice!

Metoda byla aktivně využita teprve počátkem 80. let a poté především ve specializovaných institucích. První imunoenzymatické analyzátory byly vybaveny center a krevní transfuze stanici, infekčních a pohlavních nemocnic, jak se narodil na africkém kontinentu, která se objevila na obzoru tu a tam a pak se připojil k „staré“ infekce nadstandardní AIDS vyžadují okamžitá diagnostická opatření a snažit Lékařské přípravky ovlivňující ho.

Rozsah metody ELISA

Možnosti enzýmové imunoanalýzy jsou skutečně rozsáhlé. Nyní je obtížné si představit, jak lze bez takových studií, které se uplatňují doslova ve všech oborech medicíny. Zdá se, co může IFA dělat v onkologii? Vypadá to možná. A hodně. Schopnost analyzovat detekci markerů, které jsou charakteristické pro některé typy maligních novotvarů, je základem pro včasné odhalení nádoru, jelikož jiným způsobem ještě nebylo zjištěno kvůli jeho malé velikosti.

Moderní klinická laboratorní diagnostika (CDL), s výjimkou nádorových markerů, značnou pole panely pro test ELISA, a jejich použití pro diagnostiku různých patologických stavů (infekční procesy, hormonální poruchy) a monitorování farmaceutické terapeutické sloučeniny pro stanovení jejich účinků na těle pacienta a, mimochodem, není jen člověk. V současné době se ve veterinární službě široce používá enzymová imunotest, neboť "naši malí bratři" jsou také náchylní k mnoha nemocem, které občas velmi trpí.

Tímto způsobem, Test ELISA, vzhledem ke své citlivosti a specifičnosti podle vzorků krve odebrané z žíly, může určit:

  • Hormonální stav (hormony štítné žlázy a nadledvin, pohlavní hormony);
  • Přítomnost virových a bakteriálních infekcí (HIV, hepatitida B a C, Chlamydia, syfilis, močovina a mykoplazmózy, herpes a TORCH-infekce a mnoho dalších onemocnění, způsobených patogenními mikroorganismy);
  • Stopy životně důležité aktivity mikroorganismů, které způsobily infekční proces, který skončil šťastně a přešel do stádiu vzniku imunitní odpovědi na tento patogen. Takové stopy, tj. Protilátky, v mnoha případech zůstávají v životě v krvi v oběhu, než ochránit osobu před reinfekcí.

Jaká je podstata testu ELISA?

Metoda imunoenzymu umožňuje určit nejen přítomnost samotného patogenu (kvalitativní analýzu), ale také jeho kvantitativní obsah v krevním séru pacienta.

Dávka viru nebo bakterie významně ovlivňuje průběh infekčního procesu a jeho výsledek, proto kvantitativní analýza není poslední roli v diagnostice a léčbě nemocí v různých formách a fázích.

Nicméně s vědomím, Immuno Research jako metoda ELISA, nemáme ani přemýšlet, jak se mu podařilo pokrýt tak široké spektrum mikroorganismů, které obývají naši planetu, z nichž mnohé jsou přímé ohrožení zdraví a života lidí a zvířat. Záležitost spočívá v tom, že IFA má mnoho variant (nekonkurenční a konkurenční - přímá a nepřímá), z nichž každá řeší úkol a tudíž umožňuje účelné vyhledávání.

K identifikaci imunoglobulinů jakékoliv třídy používá konvenční desky s 96 jamkami polystyren (tableta), vyznačující se tím, že jamky koncentrované v pevné fázi adsorbuje rekombinantní protein. Uvězněn v dobře se sérové ​​protilátky v krvi nebo antigeny jsou ‚známé‘ objektu, a tvoří s ním komplexní (AG - AT), který, má konjugát pevnou enzymu, při čtení výsledků zjevně změnu barvy v jamkách.

Imunoenzymatická analýza se provádí na zkušebních systémech specifické specificity, vyráběných ve speciálních laboratořích a vybavených všemi nezbytnými reaktivními složkami. Studie mohou být prováděny za pomoci praček ("vosherov") a čtecích spektrofotometrů, kde se většinou jedná o manuální práci. O plně automatický, osvobozující laboratoř z monotónní instilace, mytí a jiné rutinní záležitostí, samozřejmě, rychlejší a pohodlnější, ale ne všechny laboratoře mohou dovolit takový luxus a pokračovat v práci postaru - na poloautomatických strojích.

Interpretace výsledků testu ELISA je v kompetenci laboratorního lékaře a je nutné vzít v úvahu vlastní vlastnost téměř všech imunochemických reakcí, aby poskytla falešně pozitivní nebo falešně negativní odpovědi.

Video: Moderní výkon enzýmové imunoanalýzy

Výsledky ELISA pomocí příkladu syfilis

Analýza imunoenzymu je vhodná pro detekci všech forem syfilisu, a navíc se používá při provádění screeningových studií. Pro provedení analýzy se používá žilní krve pacienta, užívaného na prázdný žaludek. Práce používá tablety se specifickou specificitou (AT třídy A, M, G) nebo celkové protilátky.

Vzhledem k tomu, že syfilis protilátky produkované v určitém pořadí, ELISA může snadno odpovědět na otázku, kdy došlo k infekci a v jaké fázi je proces, a dekódování výsledků mohou být prezentovány následovně:

  • IgM udává trvání infekčního procesu (může se objevit s exacerbací chronických zánětlivých onemocnění);
  • IgA uvádí, že infekce se vyskytla více než před měsícem;
  • IgG naznačují, že infekce je v plném proudu nebo o nedávné léčbě, což je zřejmé při shromažďování anamnézy.

Analýza pro syfilis, jamky negativní odpovědi (a negativních kontrol) zůstává bezbarvý, zatímco pozitivní (jako pozitivní kontrola) se získá jasně žlutou barvu v důsledku změny barvy chromogenu přidané v průběhu studie. Avšak intenzita zbarvení není vždy spojen s ovládacím prvkem, tedy může být poněkud světlejší nebo slabě nažloutlý. Je otázkou, výsledky, které jsou obvykle předmětem opakované šetření závazným kvantitativní opatření, získané na spektrofotometru, ale obecně platí, že barvy je přímo úměrná množství imunitních komplexů (propojených a AG AT).

Nejvíce vzrušující imunoanalýzy jsou ELISA pro HIV

Test HIV je možná nejzajímavější pro široké spektrum lidí, protože s jistotou není možné s jistotou konstatovat, že zmizelo mnoho sociálních problémů (prostituce, drogová závislost atd.). Bohužel HIV postihuje nejen tyto vrstvy lidské společnosti, můžete se infikovat za různých okolností, nesouvisí s sexuální promiskuitou nebo užíváním drog. Pokud by však byla potřeba provést test HIV, neměli byste se obávat, že se všichni kolem vás dozví o návštěvě takové laboratoře. Nyní lidé infikovaní HIV jsou chráněni zákonem a pochybovači se mohou obrátit na anonymní kanceláře, kde mohou vyřešit problém bez obav z publicity a přesvědčení.

Imunoenzymatická metoda používaná k diagnostice infekce HIV je jednou z nejdůležitějších standardních studií, které však vyžadují zvláštní podmínky, protože téma je velmi delikátní.

Test ELISA pro HIV stojí za to po sexuálním kontaktu, transfuzi krve, jinými lékařskými manipulacemi, a na konci inkubačního období ("séronegativní okno"), ale je třeba mít na paměti, že tento časový interval není trvalý. To může skončit za 14-30 dní a může trvat až šest měsíců, takže průměrná hodnota je považována za interval 45 až 90 dnů. U HIV je krev podávána stejným způsobem jako u jiných infekcí - od žil po prázdný žaludek. Výsledky budou připraveny v závislosti na akumulaci materiálu v laboratoři a jeho pracovní zátěži (od 2 do 10 dnů), ačkoli většinou laboratoře poskytují odpověď ve stejný den nebo v další den.

Co můžete očekávat od výsledků HIV?

ELISA pro infekci HIV je určena protilátkami proti dvěma typům viru: HIV-1 (častější v Rusku a dalších zemích v Evropě a Asii) a HIV-2 (vyskytující se častěji v západní Africe).

ELISA HIV úkolem je nalézt třídu na G, které jsou u všech tří testovacích systémech, ale v pozdější době, a AT třídy A a M, odhalila nová generace rekombinantních testovací kit umožňuje vyhledání protilátek ve velmi raných fázích (inkubační doby - "Seronegativní okno"). Z testu ELISA můžete očekávat následující odpovědi:

  1. Primární pozitivní výsledek: krev je znovu zkontrolována na zkušebním systému stejného typu, ale možná i jinou sérií a jinou osobou (laboratorní asistent);
  2. Opakovaná (+) zahrnuje nový vzorek krve u pacienta se studií jako primární analýza;
  3. Další pozitivní výsledek je předmětem referenční analýzy, ve které se používají vysoce specifické testovací soupravy (2-3 kusy);
  4. Pozitivní výsledek v obou (nebo ve třech) systémech je poslán na imunoblotování (stejná metoda ELISA, ale provádí se jednotlivě pro testovací soupravy s obzvláště vysokou specifičností).

Závěr o infekci HIV se provádí pouze na základě imunoblotování. Konverzace se koná s infikovanou osobou v plné důvěrnosti. Zveřejnění lékařských tajemství v Rusku, stejně jako v jiných zemích, podléhá trestnímu trestu.

EIA zjišťuje chlamydie, cytomegalovirus a dokonce i parazity

Analýzy chlamydie a cytomegalovirové imunoanalýzy také získaly zvláštní popularitu vzhledem k tomu, že umožňuje určit čas infekce, stupeň onemocnění a účinnost terapeutických opatření.

Při zavádění chlamydií můžete také pozorovat vzhled protilátek různých tříd v různých fázích patologického stavu způsobeného infekčním agens:

  • IgM může být detekováno do sedmi dnů po infekci;
  • IgA naznačuje, že infekce v těle žije déle než měsíc;
  • IgG potvrdit diagnózu chlamydií, pomáhá monitorování léčby a určit jeho účinnost. Je třeba poznamenat, že protilátky třídy G zůstávají a obíhat v těle, bez ohledu na průchodu onemocnění, takže správná analýza dešifrování musí brát v úvahu referenční hodnoty (normy), které, mimochodem, pro každou CDL její: s ohledem na stupeň testovacího systému a specifičnost reakčních činidel, obsažené v sadě. Hodnoty normy se vejdou do formy vedle výsledku ELISA.

Co se týče cytomegaloviru (CMV), je zde poněkud odlišné: protilátky třídy M se objevují přibližně za měsíc - jeden a půl, tj. pozitivní výsledek (IgM +) se stává ve fázi primární infekce nebo během reaktivace latentní infekce a zůstává tak od 4 měsíců do 6 měsíců.

Přítomnost AT třídy G je charakteristická pro nástup primární akutní infekce nebo reinfekce. Analýza zjistila, že by virus probíhá, ale informace v jaké fázi procesu infekce - není. Mezitím vymezení norma IgG titr také způsobuje potíže, neboť zcela závisí na imunitním stavu jedince, který však je nastavena detekce imunoglobulinu třídy G. S ohledem na toto chování protilátek v diagnostice infekce CMV je potřeba k posouzení schopnosti protilátek interagovat s třídy G TSMV, pak jej "neutralizovat" (AT avidity). V počátečním stadiu onemocnění je velmi špatná IgG se vážou na antigeny viru (nízká aviditou), a teprve potom se začne zobrazovat aktivitu, a proto lze hovořit o zvýšení avidity protilátek.

Algoritmus studií IFA s podezřením na CMV

Co jsou parazity - to sotva stojí za to říct, protože pronásledují člověka od dětství a v plném slova smyslu otráví jeho život (produkty životně důležité činnosti parazitů jsou velmi jedovaté). Jsou to impozantní velikost (helmintové, jednoduše - červy) nebo malé (améba, trichomonas, lamblia).

Před nástupem enzymového imunoanalýzy v klinické laboratorní diagnostice bylo velmi obtížné najít parazity, nyní, jak říkají: "Žádný problém!". A to proto, že tam je ELISA, která najde parazita v jakékoliv formě (cysty, larvy, vejce nebo dospělé jedinci) a v žádné části lidského těla nebylo. Chcete-li to provést, stačí jen vzít krev z žíly a najít protilátky, které tělo již reagovalo na cizí antigeny.

Výhody enzymového imunoanalýzy lze říci po dlouhou dobu a hodně, protože tato metoda se podařilo vyřešit mnoho diagnostických problémů pomocí pouze žilní krve. Nepotřebují dlouhé očekávání, starosti a problémy s užitím materiálů pro výzkum. Kromě toho se testovací systémy ELISA stále zlepšují a není daleko od toho dne, kdy test poskytne 100% spolehlivost výsledku.

Analýza syfilis ELISA - interpretace analýzy. Norma a odchylky.

Pokud je předepsána analýza, proveďte test ELISA pro syfilis. Metody laboratorní diagnostiky. Výsledky analýzy - jak určit míru a odchylku. Náklady na enzymatickou imunoanalýzu.

V jakých případech je analýza ELISA pro syfilis

Zpravidla na adrese v ambulantním oddělení lékaři předepisují předání různých analýz. To jim umožňuje identifikovat infekce a nemoci, které lidé trpí. ELISA nebo tzv. Enzymová imunotest je skvělý způsob, jak zhodnotit imunitní systém těla a identifikovat přítomnost protilátek infekcí a fázi onemocnění.

Vzhledem k tomu, že do lidského těla proniká velký počet parazitů, je žádoucí provést testy a zkontrolovat každou jednotlivou osobu, aby jeden den nepřišel na infekci pozitivní výsledek.

Analýza umožňuje identifikovat látky a parazity, které jsou antigenní pro lidské tělo, a detekci imunoglobinů. To nejen umožňuje určit nemoc, ale diagnostikovat fázi. Výsledky analýzy ELISA jsou uvedeny jak kvantitativně, tak i kvalitativně.

Kdo je tedy přiřazen ke zkoušce a co je enzymem spojený imunosorbentní test? Lékaři vypracují tuto analýzu v případě, že osoba vyvine následující nemoci:

  • Vyrážka na těle je alergická reakce.
  • Virusy - herpes, cytomegalaviry.
  • Sexuálně přenosné nemoci - syfilis, trichomonias.
  • Patologie spojené s rakovinou.
  • Neurosyphilis.

Kromě těchto onemocnění je stanovena analýza stanovení hladiny hormonu v krvi. Výsledkem je hodnocení kvality léčby. Co je to syfilis, ví jistě každý člověk, ale nepředstavuje jeho rozsah a kolik lidí nakažených chodí vedle nás.

V současnosti je nejčastějším onemocněním syfilis. Je to treponem, který postihuje lidské tělo. A v důsledku toho jsou ovlivněny všechny vnitřní orgány nemocných.

Penetrace parazitů do těla způsobuje infekci osoby. Tato pohlavní nemoc může být infikována nejen sexuálně, ale také metodou pro domácnost, stojí za to pamatovat a dodržovat jednoduchá pravidla prevence.

Jedná se o velmi nebezpečnou infekci a často se stává, že se nemůže dlouho projevit. Proto může být člověk dopravcem a distributorem po dlouhou dobu, aniž by věděl, že je nemocný.

Metoda laboratorní diagnostiky

Medicína nezůstává klidná, moderní analýzy se výrazně liší od starých metod zkoumání těla. I když dokonale plnili svou roli, ale někdy museli čekat týdny a měsíce. To samozřejmě nebylo pro infikovanou osobu příznivé. Jaký byl výsledek očekávání, byla nemocná osoba.

Klasické testy - detekce syfilisů Wassermanovou metodou, Kahnova metoda začala přijímat své pozice a nahradit testy jako ELISA.

Jedná se o nejmodernější metodu detekce infekce u lidí. Výsledkem je dešifrování pomocí počítače. To vám umožní přesněji určit pozitivní výsledek nebo negativní analýzu.

Během transkripce se provádí vyhledávání protilátek proti specifickým chorobám. A jako výsledek analýzy bylo možné infekci identifikovat, když výsledek byl pozitivní. Pomocí ELISA pro detekci syfilisů se předpokládá třístupňová aplikace imunoglobulinů:

  • G, M, A - pro diagnózu jsou nejdůležitější.
  • Vyrábějí se v infikované osobě striktně v určité sekvenci.
  • Rychle určit stupeň infekce.

Výsledky EIA - norma a pozitivní analýza

Pokud mluví o analýze ELISA pro syfilis, pak je v tomto případě obtížné říci, že existuje norma nebo odchylka. Výsledkem je obvykle negativní nebo pozitivní výsledek. Kromě toho existují názvy, které určují množství protilátek v krvi.

Existuje mnoho jemností při rozluštění analýzy, pokud se projeví pozitivní výsledek, analýza bude ještě třeba několikrát opakovat, aby se vyloučila falešně pozitivní reakční metoda.

Vzhledem k tomu, že v dekódování analýzy bylo mnoho jemností, výsledný výsledek může určit pouze ošetřující lékař. Uveďte příklady v tabulce, které mohou být uvedeny výsledky enzymatického imunoanalýzy:

Ifa na syfilis

Jaká je metoda ELISA?

Imunoenzymatická analýza je základem diagnostiky mnoha infekcí, nejen pohlavních a syfilisů. Tato metoda je založena na stanovení protilátek v séru z krve pacienta odebraných z žíly.

V krvi každého z nás existují speciální struktury proteinové povahy - protilátky, které jsou zastoupeny různými třídami.

Jedna z hlavních funkcí protilátek je vazba na antigeny a tvorbu určitých komplexů, které se těžko rozpouštějí. Pro tvorbu protilátek jsou odpovědné za krevní buňky - lymfocyty.

Pokud se v lidské krvi vyskytne infekční agens jakékoliv onemocnění, produkují se v reakci protilátky, které prostřednictvím svých receptorů vytvářejí kontakt s jasně definovanými antigeny tohoto patogenu.

Takový komplex se nazývá kombinace "antigenů + protilátek". A je to metoda ELISA pro syfilis, která umožňuje zaznamenávat jednotlivé komplexy protilátek a antigenů treponem se syfilisem za přítomnosti enzymů a speciálních značek v činidlech.

Stanovení takových komplexů ELISA metodou infekce syfilisem bylo umožněno pouze za pomoci speciálních enzymových sloučenin, které byly přidány do studovaného materiálu.

Vzhledem k tomu, že tato diagnostická metoda byla aktivně používána k určení jednotlivých tříd imunoglobulinů, které se objevují na pozadí určité infekce.

Navíc, s enzýmovou imunotestu, nejen přítomností, určuje se kvalitativní reakce, ale také kvantitativní, počet titrů protilátek.

Taková analýza syfilisu vám umožňuje zhodnotit stav po infekci a po léčbě sledovat dynamiku na pozadí přijaté terapie.

Specifické sérologické testy se nazývají treponemální testy, protože tyto testy používají bledé treponemy nebo jejich antigeny, což jsou antigeny původem z treponemu.

Účelem treponemálních testů je detekce specifických protilátek proti antigenním strukturám původců syfilis, tj. Protilátek specificky namířených proti bakteriím samotným T.

Pallidum, a nikoliv proti tělním tkáním poškozeným treponem. Specifické anti-treponemální protilátky třídy IgM mohou být detekovány již na konci druhého týdne onemocnění.

Včasné a kvalitativní rozpoznání syfilisové infekce je v současnosti spojeno s rozsáhlým zavedením treponemálních testů.

Treponemální testy se používají pouze pro diagnostiku syfilisu a nepoužívají se k monitorování vyléčení, u některých pacientů mohou být t / k treponemální reakce po mnoho let po plné léčbě syfilisu pozitivní.

Podle klinické specifičnosti jsou treponemální testy srovnatelné s ne-treponemálními testy, v klinické citlivosti jsou vynikající.

ELISA nebo enzýmová imunotest se týká sérologických testů a je určen k detekci a diagnostice patologických mikroorganismů v krevním séru.

Prostřednictvím analýzy jsou určeny různé třídy imunoglobulinů pro bakterie: IgM - v akutním patologickém procesu a IgG ve stádiu zotavení, které v některých případech přetrvávají po celý život.

Prostřednictvím imunoenzymatické diagnostiky se objevují onemocnění různých etiologií:

  • Vírusová. Virová hepatitida, cytomegalovirus (CMV), herpes, spalničky, příušnice, plané neštovice, leukémie T-buněk, zarděnek, chřipky, parainfluenzy, adenovirus, mononukleóza.
  • Bakteriální. Tuberkulóza, brucelóza, salmonelóza, záškrt, infekce Helicobacter pylori, Legionářská, černý kašel. Infekce způsobené streptokoky, stafylokoky, pneumokoky, meningokoky, Haemophilus influenzae - meningitidy, pneumonie, angína, spála, revmatická horečka, sepse, abscesy, pyelonefritida, otrava jídlem, a urogenitální trakt: chlamydie, mykoplazmata, Ureaplasma, kapavka.
  • Infekce způsobené protozoemi. Amebiáza, toxoplazmóza, kryptosporidóza.
  • Parazitické. Echinokokóza, toxokariasis, pneumokystis.
  • Fungal. Aspergilóza, kandidóza.

Test ELISA je také indikován pro diagnostiku syfilisů s potvrzením pozitivních výsledků metodou RV a umožňuje monitorovat účinnost léčby v patologickém procesu.

Imunoenzymatická analýza je předepsána podle údajů (je-li podezření na infekci mikroorganismy), je povinná v těhotenství a před operací k identifikaci nosiče různých bakterií.

Postup analýzy se provádí ráno na prázdném žaludku a z žíly se odebere materiál (krev). Výsledky diagnostické studie jsou připraveny až 10 dní.

Typy výzkumu a biomateriály pro analýzu

Pro testy treponemu jsou známy následující:

  • Komplexní fixační reakce (Wassermanova reakce) s treponemálním antigenem (RSKT).
  • Fluorescenční treponemální protilátka (FTA). Používá se v několika modifikacích: RIF-200 (FTA-200); RIF-abs (FTA-abs; FTA-abs dvojité barvení; FTA-abs IgM; RIF-abs-IgM; 19S-IgM-FTA-abs); RIFTS je reakce imunofluorescence s celou krví.
  • Pasivní hemaglutinační reakce (TPGA, Treponema pallidum hemaglutinační test, TPHA).
  • Reakce pasivní aglutinace želatinových částic senzibilizovaných antigenem původců syfilisu (TPPA, aglutinační test Treponema pallidum)
  • Analýza imunoenzymu (ELISA, Enzyme Lynced Immunosorbent Assay).
  • IHL - imunochemiluminiscenční studie (IHL, Chemiluminiscence immunoassays, CLIA)
  • Reakce imobilizace bledého treponem RIBT (RIT) v cizí literatuře TPI (imobilizační test Treponema pallidum). V posledních letech se využívá stále častěji a pouze pro vědecké účely a ve výzkumných laboratořích.
  • Imunobloting (Western Blot, Line Blot). Zpravidla se používá lineární imunoblotování, což je varianta enzýmové imunoanalýzy. Používá se ve dvou verzích: pro detekci protilátek IgG a IgM proti příčinným účinkům syfilisu

Reakce pasivní hemaglutinace (PHA) a enzyme-linked imunosorbent (ELISA) pro protilátky třídy IgM, IgG a celkově mají univerzální význam a jsou použity pro screening, a pro potvrzení diagnózy.

Tyto techniky jsou jednoduché a dostupné v chování, mají vysokou reprodukovatelnost, jsou automatizované. Při použití ELISA nebo RPGA je povinnou podmínkou použití opakované analýzy stejného zkušebního systému jako při počátečním vyšetření.

FTA (fluorescenční protilátky proti treponemám, FTA) na základě vizualizaci pod fluorescenční mikroskopie komplexy antigenu s protilátkami za použití séra proti lidskému Ig značené fluorochromem.

IEF metody ELISA, imunoblotem (IB) mohou detekci specifických protilátek proti antigenům T. pallidum (syfilis testy jsou pozitivní) od 3. týdne po infekci a dříve, PHA a RIBT - od 7-8 týdnů.

Z nejčastějších konkrétních treponemálními testů ve světě, ve kterém se používá aglutinaci, následující může být uveden. V TPHA (Treponema pallidum hemaglutinační test, TPHA) mikrogemagglyutinatsii reakci (microhemagglutination testu pro Treponema pallidum, MHA-TP) s pozitivním výsledkem aglutinaci erytrocytů potažených (ošetřené) treponemám antigenu, v přítomnosti anti-treponemálními protilátek. Použití jako želatina nebo latexové částice nosiče v testovaném TRRA (Treponema pallidum aglutinace) umožňuje použít zkoušku zatížení v případě, že lýze erytrocytů (erytrocytů rozkladu v důsledku destrukce membránách) séra některých pacientů, a také propůjčuje stabilitu činidel.

Živá patogenní treponemie

RIT, RIBT (reakce imobilizace bledých treponemů)

RIF (imunofluorescence reakce) FTA-ABS (RIF vstřebávání), RIF-c, IEF kapilární krve z prstu, atd.

Proteiny se oddělí elektroforézou na polyakrylamidovém gelu a přenesou se na membrány metodou Western blot

Proteiny se oddělí elektroforézou na polyakrylamidovém gelu a přenesou se na membrány metodou Western blot

Laboratorní testy pro detekci treponému se nazývají sérologická diagnostika. Serodiagnostika syfilisu je podmíněně rozdělena do dvou skupin:

  • Specifické testy, které poskytují pozitivní test i po vyléčení choroby;
  • Nešpecifické analýzy, které ukazují výsledek v případě, že v určitém čase existuje onemocnění.

Jaký je název analýzy syfilisu? Výzkum je rozdělen do dvou skupin:

  • Syfilis rpga, který je dešifrován jako reakce pasivní aglutinace nebo syfilis, který se přenáší na hemaglutinaci Treponema pallidum;
  • RIF nebo imunofluorescenční reakce;
  • RIT nebo reakce imobilizace treponem;
  • Imunoenzymatická analýza;
  • Imunoblot pro syfilis nebo imunoblot;

Diagnóza syfilisu má některé zvláštnosti a odlišuje se od diagnózy dalších bakteriálních infekcí. Složitá struktura a antigenní vlastnosti bledého treponému způsobují chyby při interpretaci výsledků sérologických reakcí.

Krevní test na syfilis se nabízí třem hlavním skupinám pacientů:

  1. 1 Screening a vyšetření populačních skupin (včetně těhotenství, registrace v konzultacích žen, vstup do práce a registrace medknizhki a tak dále).
  2. 2 Screening v rizikových skupinách (nechráněný sex s osobou infikovanou syfilisem, lidé po nucených sexuálních kontaktech, infikovaných HIV a tak dále).
  3. 3 Osoby s příznaky onemocnění nebo osoby podezřelé ze syndromu infekce.

Všechny laboratorní metody jsou podmíněně rozděleny na přímé a nepřímé.

Přímé metody

  1. 1 Identifikace Treponema pallidum v tmavém poli (tzv. Darkfield microscopy).
  2. 2 Infekce pokusných zvířat (kultivace u laboratorních zvířat).
  3. 3 PCR (polymerázová řetězová reakce).
  4. 4 DNA nebo hybridizaci nukleových kyselin.

Nepřímé metody

Sérologické reakce jsou metody laboratorní diagnostiky založené na detekci protilátek (zkrácené AT) na antigeny bledého treponému (zkráceně AH). Mají zásadní význam pro potvrzení diagnózy.

  1. 1 Non-treponemální testy:
    • Wassermanova reakce (RAC);
    • Reakce mikropréčení (MR, RMP) a její analogy, které jsou uvedeny níže;
    • Test rychlých plazmových reaktanů (RPR, RPR);
    • Test s červeným toluidinem a sérem (TRUST);
    • Non-treponemální test Laboratoře pro studium pohlavně přenosných nemocí - VDRL.
  2. 2 Treponemální testy:
    • P-imobilizace Treponema pallidum - RIBT / RIT;
    • P-infekce imunofluorescence - RIF, FTA (ředění séra RIF-10, RIF-200, RIF-abs);
    • P-pasivní hemaglutinace (RPHA, TPHA, TPHA);
    • Imunoenzymová analýza (ELISA, EIA);
    • Imunoblotting.

Obrázek 1 - Algoritmus sérodiagnosti syfilisu

Histomorfologické metody

Tyto metody se redukují na identifikaci znaků histomorfologie syfilistických projevů. Pozornost je věnována jemnosti struktury pevné chancre.

Diferenciální diagnostika infekce pomocí histologie je však velmi obtížná. Histomorfologie se používá s jinými laboratorními a klinickými testy.

Pro identifikaci choroby se používají různé metody a biomateriály. V počáteční fázi je stanovení syfilisu pomocí bakterioskopického testu.

Vzorky se vyšetřují pod mikroskopem. Přístroj může detekovat kmeny patogenu.

Později se provádí sérologické testy. Díky nim jsou ve vzorcích detekovány antigeny a protilátky proti této nemoci.

Metody stanovení sexuální infekce jsou rozděleny do 2 kategorií:

  • Přímý, odhalující patogenní mikroorganismus. Patří mezi ně: mikroskopie na tmavém poli, analýza RIT (infekce králíků s biomateriálem pro výzkum), PCR-polymerázová řetězová reakce (pomocí této metody jsou nalezeny genetické prvky patogenu).
  • Nepřímé (sérologické) mohou detekovat protilátky proti patogenu. Jsou produkovány imunitním systémem jako odpověď na infekci.

Sérologické metody jsou rozděleny do dvou kategorií: treponemal a non-treponemal.

Ne-treponemální, zahrnující: test s toluidinovou červenou, RSK analýzu, RPR test, krevní test pomocí RMP rychlé metody.

Treponemal, kombinující: imunoblotting, RSK-test, RIT analýzu, studium RIF, RPHA-test, ELISA-analýza.

Informativnost testů na infekci je odlišná. Nejčastěji se jedná o hlavní typy testů na syfilis, které zahrnují serologické techniky. Pacienti, kteří potřebují test, stanoví lékař jednotlivě testy.

Biomateriál pro výzkum

Identifikovat bledý treponemus - patogen, který vypadá jako spirála a způsobuje syfilis, odebírá vzorky:

  • žilní krve;
  • cerebrospinální tekutina (sekrece z páteřního kanálu);
  • obsah mízních uzlin;
  • tkáňové ulcerace.

Pokud je nutné provést testy na detekci syfilisů, krev se odevzdává nejen z ulnární žíly, ale také z prstu. Výběr biomateriálu a způsob vyšetřování je ovlivněn závažností průběhu infekce a vybavením diagnostického centra.

Potvrdit nebo vyloučit syfilis: anamnéza, příznaky, testy

Potvrzení nebo vyloučení diagnózy může pouze dermatovenereolog. Urolog nebo gynekolog může podezření na chorobu vyvolat pouze vnějšími příznaky. A pak by měli pacienta nasměrovat k dermatovenerologovi pro další vyšetření, léčbu a následné sledování.

Diagnóza "syfilisu" je založena na kombinaci následujících příznaků:

  1. Na přítomnost nebo nepřítomnost vnějších projevů a příznaků.
  2. Výsledky alespoň dvou laboratorních testů: testy netrponemální (RMP, RW nebo RPR) a treponemální (RPGA nebo ELISA).
  3. Na základě údajů o existenci syfilisu a zda již byla léčba provedena.

Pokud příznaky přetrvávají

Pokud nejsou žádné vnější signály


Pak se diagnostika stává složitějším. Zde se lékaři spoléhají pouze na testy a informace o probíhající nebo dříve neléčené léčbě.

Možnosti v tomto případě:

  • V případě non-treponemálními (jeden z HLR / RW / RPR) a treponemálními test (TPHA / IFA) - pozitivní, provádí další alternativní zkušební treponemálními (ELISA, v případě, že první test byl PHA, a naopak - TPHA pokud byla IFA). Pokud je test negativní, pak je pacientova krev odeslána odborné laboratoři a provedeny další testy. V případě, že druhá treponemálními testu se stává pozitivní, diagnostikovány jako „latentní syfilis“.Takové stav může nastat nějaký čas po ukončení léčby. Pokud byl pacient léčen před touto léčbou, provede se další studie na I g M, aby se potvrdila diagnóza. S pozitivním výsledkem - diagnóza je potvrzena, ale studie se doporučuje opakovat po 2 týdnech. S negativními výsledky je syfilis vyvrácen.
  • Pokud je test non-treponemálními (HLR / RW / RPR) negativní a treponemálními (TPHA / IFA) je pozitivní, podmínka může být hodnocen jako „pozdní syfilis“ nebo „nedostatek syfilis“ v případě, že pacient byl již dříve v držení plné léčbu. Pro odlišení těchto dvou stavů se provádí na další test I g M (IFA I g M, Rif -abs- I g M, Immunoblotting- I g M). Jestli je v krvi k dispozici, vložte "pozdní syfilis" a zacházejte. Pokud ne, je pacient považován za zdravého.
  • V případě, že RPR (nebo RW / VLR) je pozitivní, TPHA pozitivní a ELISA negativní (nebo naopak: PHA „-“ a IFA „+“), výsledky zkoušek jsou sporné, a doporučuje se poslat krev do expertní laboratoře nebo provést alternativní testy (IFA, Imunoblotting).
  • Je-li nepříznivý test (PMP / RW / RPR) pozitivní a treponemální (Egg / EIA) je negativní, provádí se další test treponem (ELISA / ELISA). Pokud dává pozitivní výsledek, je krev odeslána odborné laboratoři. Pokud je negativní, diagnóza je vyloučena a výsledek testu, který není testován, je považován za falešně pozitivní.

Klasifikace metod laboratorní diagnostiky

Sérologickou diagnózu pomáhá lékaři studovat dynamiku tvorbě protilátek v organismu pacienta syfilis v časných stádiích onemocnění, během léčby a po jejím skončení, vyřešit problém relapsu onemocnění u pacienta nebo reinfekce (reinfekce), diagnózu syfilis do hromadných onemocnění.

Protilátky proti bledému treponému IgM

První infekce IgM se začíná vyvíjet po infekci. Začínají se detekovat pomocí sérologických reakcí od druhého týdne po infekci.

Po 6 až 9 týdnech onemocnění se jejich počet stává maximální. Pokud nebyl pacient léčen, pak protilátky zmizí za šest měsíců.

IgM protilátky zmizí po 1 až 2 měsících. po léčbě časného syfilisu po 3 až 6 měsících.

- po léčbě pozdního syfilisu. Pokud je jejich růst zaznamenán, je to známka relapsu syfilisu nebo indikuje reinfekci.

IgM molekuly jsou velké a neprocházejí placentou plodu.

Protilátky proti bledému treponému IgG

Protilátky IgG imunoglobulinů se objevují na konci prvního měsíce (ve 4. týdnu) od okamžiku infekce. Jejich titr je vyšší než titr IgM. IgG přetrvává po vytvrzení po dlouhou dobu.

Nešpecifické protilátky

Existuje mnoho sérologických reakcí. To je způsobeno antigenní rozmanitostí bledých treponemů.

Pacientova krevní sérum v různých fázích syfilis navíc k určité formě nebo jiného ne-specifických protilátek - aglutininy, na komplementu, immobiliziny, protilátky, které způsobují imunitní fluorescence pretsipitiny a další.

Sérologické reakce pro detekci nespecifických protilátek mají relativní specifičnost, proto, aby se zabránilo diagnostickým chybám, nemělo by být použito jediné, ale komplex sérologických reakcí (DAC).

Falešně pozitivní testy na syfilis

Protilátka reagin, se vyrábějí v krvi proti kardiolipinu antigenu, zaznamenány a to nejen v syfilis, ale i v dalších chorob: kollagenozah, hepatitida, onemocnění ledvin, tyreotoxikóza, nádorových onemocnění, infekčních onemocnění (lepra, tuberkulóza, brucelóza, malárie, tyfus, spála), těhotenství a menstruace cyklů, když se vezme tučných jídel a alkoholu.

Charakteristickým rysem testů bez treponemu je produkce falešně pozitivních reakcí. Je třeba poznamenat, že počet falešně pozitivních reakcí se zvyšuje s věkem.

Obr. 2. Na fotografii je primární syfilis u žen.

Sérologické testy na syfilis jsou rozděleny do testů treponemal a non-treponemal.

1. Non-treponemal testy

Jako antigen v této skupině testů se používá kardiolipinový antigen. Lipidové antigeny syfilisových patogenů jsou nejpočetnější.

Tvoří 1/3 suché hmotnosti buňky. Při použití ne-treponemálních testů se detekují protilátky-reaktanty, které se produkují proti kardiolipinovému antigenu.

Tato skupina zahrnuje reakci fixace komplementu (RSKard), mikrovokační reakci (RMP), rychlou reakci reakce plazmy (RPR) atd.

Při ne-treponemálních testech se provádí primární screening pro syfilis (vyšetření populačních skupin) a možnost získání kvantitativních výsledků umožňuje použití těchto testů k monitorování účinnosti léčby.

Pozitivní výsledky testů bez treponemu by měly být potvrzeny testy treponem. Charakteristickým znakem testů bez treponemů je produkce falešně pozitivních reakcí.

2. Treponemální testy

Treponemální testy používají antigeny s treponemálním původem, izolované z kultivovaného bledého treponému. S jejich pomocí se potvrzují pozitivní výsledky ne-treponemálních testů.

Do této skupiny patří: RSKtrep - fixace komplementu, RIF - imunofluorescence a jeho modifikace, RHS, RIBT - imobilizace reakce bledě treponami, TPHA - pasivní hemaglutinace reakce, ELISA - enzymové imunoanalýzy.

3. Testy na syfilis za použití rekombinantních antigenů

Antigeny pro tuto skupinu testů jsou geneticky upraveny a používány v reakcích - RPGA a ELISA, imunoblotová analýza (IB) a imunochromatografická analýza.

Obr. 3. Pro diagnostiku syfilisu se používá soubor sérologických testů.

Pro detekci syfilisu se používají netrponemální testy nebo komplex sérologických reakcí (DAC). Sérologická diagnóza se aplikuje od 5. týdne od okamžiku infekce nebo 2-3 týdny po vzniku pevné chancre.

Protilátky jsou detekovány prakticky u všech pacientů s čerstvým primárním, sekundárním a rekurentním syfilisem. Sérologické reakce jsou pozitivní u 70-80% pacientů s terciárním aktivním syfilisem, u 50-60% případů u pacientů s terciálním latentním syfilisem.

Sérologické reakce používající ne-treponemální testy mohou poskytnout falešně pozitivní výsledky.

Obr. 4. Odběr vzorků krve pro analýzu syfilisu.

Jejich negativní stránkou je nemožnost využít pro sledování účinnosti léčby, získání pozitivní výsledky v spirochetosis a non-pohlavních treponematoses a získání falešně pozitivní výsledky pro rakovinu, lepry, některé choroby endokrinní.

Treponemální testy používají antigeny s treponemálním původem. Takové testy jako RPGA, ELISA a RIF zůstávají pozitivní po mnoho let po vytvrzení syfilisu a v některých případech po celý život.

RIBT a RIF jsou specifičtější ze všech sérologických reakcí používaných k diagnostice syfilisu. Umožňují rozlišit falešně pozitivní reakce, identifikovat pozdní formy syfilisu, ke kterým dochází při negativních reakcích.

S pomocí RIBT jsou falešně pozitivní reakce zjištěny u těhotných žen, když je potřeba vyřešit problém infekce dítěte.

Reakce imobilizace bledých treponemů (RIBT, RIT)

Podstata reakce spočívá v tom, že protilátky v séru pacienta blokují bledý treponém. Negativní je reakce při imobilizaci až 20% patogenů, slabě pozitivní - 21 - 50%, pozitivní - 50 - 100%.

RIBT někdy dává falešně pozitivní výsledky. Test je složitý a časově náročný, nicméně je nezbytný pro diferenciální diagnostiku latentních forem onemocnění a falešně pozitivní výsledky sérologických reakcí, včetně těhotných žen.

RIBT dává 100% pozitivní výsledky u sekundárních, časných a pozdních syfilisů, v 94 - 100% případů - s jinými formami syfilisu.

Reakce imunofluorescence (RIF)

Spolu s sérologických diagnostických metod detekce světlých treponemy (mikrobiologické diagnostika) hraje důležitou roli, a to zejména v průběhu séronegativních syfilis, když jsou v krvi žádné protilátky, ale to je prvním projevem čerstvé primární syfilis (chancre).

Pro studium biologického materiálu, je oddělitelná od povrchu pevného vředů obsah (primární syfilitický vřed) pustulózní syphilides, vlhké a erozivní papuly, tečkované infikovaných lymfatické uzliny, mozkomíšní mok a plodové vody pro PCR - krev.

Nejlepší metodou pro detekci syfilisových patogenů je vyšetření biologického materiálu v tmavém poli mikroskopu. Tato technika vám umožňuje vidět bledý treponém v živém stavu ke studiu jeho strukturálních rysů a pohybů, k odlišení patogenních patogenů od saprofytů.

Obr. 15. Analýza syfilis - mikroskopie tmavého pole.

Obr. 16. Při studiu suchých tahů se používá barvení podle Romanovského-Giemsy. Bledý treponém zbarvený v tomto případě v růžové, všechny ostatní druhy spirochaete - v fialové.

Detekce bledého treponem s mikroskopií v tmavém poli je absolutním kritériem pro konečnou diagnózu syfilisu.

Obr. 17. K detekci bakterií se používá imunofluorescenční (RIF) reakce, treponemální test. Specifický komplex antigen-protilátka, když je kombinován se specifickým sérem značeným fluorochromem, ve světle luminiscenčního mikroskopu, poskytuje záření bakterií ve formě zelenkavé barvy.

Obr. 18. Příčinné faktory syfilisu lze snadno vidět v roztocích připravených podle Levaditiho techniky (impregnace stříbrem). Bledý treponém tmavé barvy na pozadí žluté barvy buněk infikovaných tkání.

Obr. 19. Příčinný účinek syfilisu při vícenásobném zvětšení.

Obr. 20. Na fotografii kolonie bledého treponem. Je obtížné získat kulturu bakterií. Prakticky nevyrůstají na umělém živném médiu. Na médiích obsahujících konská a králičí séra se kolonie objevují 3. až 9. den.

V tabulce 1 uvádíme možné výsledky analýz a jejich dekódování. Jak je patrné z tabulky, hlavní hodnotou pro dekódování je komplexní vyhodnocení testů.

Tabulka 1 - Dešifrování výsledků sérologických reakcí (krevní testy syfilisu). Chcete-li zobrazit kliknutí na tabulku

Hodnocení testovací reaktivity se provádí také křížemi:

  1. 1 Maximální odezva (ostře pozitivní test) je indikována pomocí 4 křížek.
  2. 2 Pozitivní vzorek je označen pomocí 3 křížů.
  3. 3 Slabě pozitivní reakce je indikována dvěma křížemi.
  4. 4 Jeden kříž označuje pochybný a negativní výsledek.
  5. 5 Negativní odpověď je označena znaménkem mínus.

Problém optimalizace laboratorní diagnostiky syfilisu zatím neztratil svou relevanci. Moderní metody diagnostiky, navzdory touze vědců přinést diagnostiku na nejvyšší možnou citlivost a specificitu, vyžadují kontrolní kontrolu a individuální přístup.

Zvláštností syfilisové infekce je fenomén séroreinfekce, který nikdy nedostal vědecké vysvětlení. Diagnóza se provádí po úplném vyšetření pacienta epidemiologickými, klinickými, laboratorními metodami.

Na pozadí hospodářského a technického vývoje medicíny je také dosaženo pokroku v rozvoji nových kritérií diagnostiky syfilisu. To vše bude rychle, úspěšně a přesně léčit pacienty.

Někteří pacienti, kteří přicházejí k vyšetření gynekologovi nebo andrologovi, neposkytují objektivní informace o kvalitě sexuálního života.

Snad důvodem je obvyklé rozpaky, nebo možná chyba je nedostatek informací v oblasti pohlavně přenosných chorob.

Kde provést analýzu

Výsledky testů a klinické projevy přímo závisí na imunitní odpovědi těla.

Ranní syfilis

V podmínkách vybavených laboratoří a lékařských center může být stanovení enzymové enzymové reakce pomocí treponému metodou stanovení několika metodami, které se nazývají přímé a nepřímé.

Tyto metody jsou však založeny na jedné metodě, která umožňuje analýzu syfilisu metodou ELISA. Tato zkouška se provádí určitým způsobem.

Laboratorní technik má speciální deskový panel s otvory ve tvaru zaoblených dutin v rozsahu až sto. Když je stanovena syfilis ELISA, v sadách pro tento test se použijí speciálně připravené koncentrované antigeny na syfilis, které se umístí do jamek destičky ELISA.

Po odebrání krve pacienta ráno na prázdný žaludek je sérum odděleno od krve a umístěno do studní s antigeny. V jamkách dochází k vazbě antigenu na protilátky.

Metoda ELISA pro syfilis je založena na vazebné reakci prvního stupně imunitních sloučenin a konjugátů se speciálním enzymovým štítkem, který je potřebný k čtení kvality reakce.

V tomto stádiu se vedle enzymu peroxidasy přidávají chromogenní barviva k barvení materiálu v závislosti na výsledku reakce. Na základě vzhledu barevných vrstev v destičce se syfilis IFA dešifruje.

V souborech pro různé metody ELISA jsou připojeny tabulky barevných schémat, podle nichž je stanoveno množství, hladina imunoglobulinů, protilátky ze séra pacienta v 1 jednotce objemu.

Také speciální zařízení, spektrofotometr pro provádění fotometrie a odhad hustoty materiálu v jímkách se používají k odhadu výsledku reakce ve srovnání s kontrolními vzorky.

Na základě hustoty je výsledek jasně stanoven pro každý patogen syfilis v normách a patologii.

Pro dosažení nejpřesnějších výsledků laboratorní diagnostiky pohlavních vředů syfilisu se doporučuje použít několik testů najednou, i když trvání takové studie trvá déle, ale stojí za to.

Nejčastěji podávaný krevní test na syfilis po vyšetřeních je uveden ve formě číslic, jejichž dekódování má toto označení:

  • "4 +" - mluví o ostře pozitivním výsledku;
  • "3+" je prostě pozitivní výsledek;
  • "2+" je slabě pozitivní výsledek;
  • "1+" je pochybný výsledek;
  • "-" - negativní výsledek.

Nicméně po obdržení výsledků analýz s pozitivními údaji neznepokojujte okamžitě, jak bylo uvedeno výše, ne všechny testy mohou poskytnout úplné informace o přítomnosti syfilisu.

Například klinická analýza RW, kvůli její nespecifickosti, může dát falešně pozitivní výsledky, pokud pacient trpí jinými nemocemi. Například:

  • lupus erythematosus;
  • revmatoidní artritida;
  • sklerodermie;
  • mononukleóza;
  • spalničky;
  • hepatitida;
  • srdeční infarkt;
  • maligní formace na jakémkoli orgánu.

Falešně pozitivní výsledky mohou být také zjištěny u zcela zdravých lidí nebo lidí zneužívajících alkohol a drogy.

Proto bych chtěl zdůraznit, co bylo řečeno dříve, že je nezbytné provést krevní test na syfilis najednou několika způsoby a nejlépe testováním treponemal.

Důležitou roli ve spolehlivosti výsledků analýzy krevního séra pro syfilis hraje náležitá příprava na její podání, jakož i výběr laboratoře pro diagnostiku. Dnes se taková analýza provádí ve veřejných a soukromých zdravotnických laboratořích.

Samozřejmě, že v soukromých institucích tato diagnostika bude mít určité náklady, zpravidla cena analýzy závisí na zvolené metodě a naléhavosti výzkumu. Také zde můžete dělat to anonymně.

Chcete-li analyzovat krev pro syfilis co nejpřesnější, měli byste dodržovat několik jednoduchých pravidel:

  1. Za prvé, dávat krev pouze na prázdný žaludek a lépe ráno.
  2. Za druhé, v předvečer testu je přísně zakázáno vypít alkoholické nápoje, dokonce i s nejnižším složením.
  3. Za třetí, kromě séru, která je obvykle převzata z loketní žíly, jako materiál pro laboratorní testování na přítomnost syfilis, může se stát vypouštěcí chancre (charakteristické pro syfilis lézí) nebo defekt lymfatických uzlin.

Máte-li podezření, že vy nebo někdo z vaší rodiny nakazilo syfilis, ale z nějakého důvodu dělat krevní testy, Laboratorní pacienta na syfilis není možné, pak primární diagnóza, můžete použít speciální rychlý test doma.

Takový test můžete koupit v jakékoli síti lékáren a řídit se přísně podle přiložených pokynů. Pouze v tomto případě budete moci získat spolehlivý výsledek.

Obvykle je rychlá diagnostika syfilis doma prováděna na základě krve. Bude to trvat doslova jednou kapkou, abyste získali očekávaný výsledek, který vás neustálí (doslova pár minut).

K dispozici jsou také sady pro diagnostiku syfilis doma s dalším odesláním biologického materiálu přijatého do specializované instituce.

V takovém případě byste neměli zanedbávat radu odborníka a po samodiagnostice si sama léčit nebo naopak odmítnout, věřit, že nemáte žádné nemoci. V každém případě, abyste objasnili celý obrázek, je nutné konzultovat lékaře bez zbytečného odkladu.

Imunosorbentní test enzymu (ELISA) je jednou z mnoha metod sérologické diagnostiky infekčních onemocnění.

Imunosorbent (ELISA) v serodiagnosis syfilis - test protilátek třídy M, G a A (IgM, IgG, IgA) proti antigenům Treponema pallidum. Je možné ELISA s mozkomíšním moku.

Zavedení enzymového imunoanalýzy (ELISA) do praxe namísto Wassermanovy reakce a dalších kardiolipinových testů významně zlepšilo kvalitu laboratorní diagnostiky syfilisu. Významnou výhodou této metody je možnost automatizace výzkumného procesu, který umožňuje snížit vliv lidského faktoru.

1. Historie metody ELISA

Hlavní principy enzymového imunoanalýzy na povrchu nosiče v pevné fázi byly vyvinuty E. Engvarem a spoluautorem.

(1971), B. Van Weeman a A.

Schuurs (1971). Enzymem spojený imunosorbent byl nejprve navržen pro diagnózu syfilisu v roce 1975.

Visser, který ocenil potenciál tohoto automatizovaného testu. ELISA začala být široce používána v diagnostice syfilisu v 80. letech.

, kdy byly vyvinuty a certifikovány diagnostické testy a byly standardizovány zkušební metody. V SSSR byl technikou stanovení metody ELISA pro diagnostiku syfilis vyvinut B.

V. Kotrovský (1982, 1983).

2. Princip metody ELISA

Imunoenzymová analýza (ELISA) mechanizmem reakce se blíží RIF (detekují se stejné protilátky). Imunotest Výzkum reakce enzymu se vztahují k imunologické reakce, vztaženo na velmi specifické interakce mezi antigeny Treponema pallidum protilátek syfilis pacientů.

V syfilologické praxi se používá nepřímá varianta testu ELISA. Princip nejčastěji používaného nepřímého variantu reakce je následující.

Na povrchu polystyrenové desky jsou fixovány imunitní komplexy, které jsou tvořeny interakcí protilátek pacienta se syfilisem s bledými antigeny treponema.

Poté jsou identifikovány v barevné reakci za použití specifických konjugátů a odpovídajících substrát-chromogenních přísad.

Postup pro provedení testu je následující: sérum pacienta je umístěno na nosiči na pevné fázi s antigenem připojeným k němu. Pokud jsou v něm přítomny protilátky, na povrchu nosiče se vytvoří komplex antigen-protilátka.

Pro "vyjádření" výsledků reakce se používají protilátky proti lidskému Ig konjugované s enzymovými markery. V případě pozitivní reakce se enzym, který se připojil k komplexu antigen-protilátka, rozkládá substrát přidaný do systému, čímž se vyvíjí barevná barvení různé intenzity.

Při stanovení reakce komplexní adsorbována na pevné fázi AG a AT se provádí pomocí MAR protilátek značených enzymem, pro barevnou reakci s enzymovým substrátem.

Při reakci se stanovení komplexu antigenů sorbovaných na pevné fázi a protilátky provádí enzymem značenými antiglobulinovými protilátkami.

ELISA představuje možnost detekce sérových Ig různých tříd. Na trhu existují systémy, které umožňují samostatně stanovit IgM a IgG a celkové protilátky.

S rozvojem laboratorní diagnostiky v souvislosti s modernizací zdravotní péče v Ruské federaci byla zavedena laboratorní automatizace do praxe laboratoří, což umožňuje standardizovat analytické fáze výzkumu.

To pomáhá zlepšit kvalitu diagnostiky. Díky zavedení automatizace byly použity, nové high-tech metod s vysokou senzitivitou a specificitou, jako je například analýza immunohemilyuminestsentny (Icha) (chemiluminiscence immunoassay - CLIA).

Identifikujte syfilis ELISA, důstojnosti:

  • Vysoká citlivost metody - více než 90%;
  • Schopnost sledovat dynamiku onemocnění, porovnávající počet protilátek v různých časových intervalech;
  • Prakticky v každé zdravotnické instituci.

Abyste předešli riziku zkreslení výsledků během analýzy, musíte dodržovat pravidla. Pokud se tak nestane, je možný falešně pozitivní test na syfilis. Chcete-li vyloučit chyby, je nutné:

  • Dává krev na prázdný žaludek;
  • Několik dní se zdržujte od alkoholu, mastných potravin a fyzické únavy;
  • Nekuřte 2 hodiny před testem;
  • Řekněte o přijatých lécích, o nedávných očkováních, o přítomnosti onemocnění, stavu těhotenství a dalších dostupných okolnostech.

Doba trvání testu ELISA pro syfilis závisí na pracovním zatížení laboratoře a dostupnosti zdravotnického vybavení v něm.

Imunoenzymová analýza (zkratka ELISA) je založena na specifické reakci antigen-protilátka. Biologický materiál (krevní sérum pacienta, cerebrospinální tekutina) se zavádí do jamek na tvrdém povrchu, z nichž jsou fixovány antigeny bledého treponému.

Testovaný materiál se inkubuje, pak se promyjí protilátky, které se neváže na antigeny (viz obrázek 5).

Identifikace získaného komplexu se provádí ve fermentačním stupni pomocí enzymem značeného imunitního séra. Když dojde k chemické reakci, enzym vyfarbí výsledné komplexy.

Intenzita barvení závisí na množství specifických protilátek v krvi pacienta a je fixována spektrofotometrem.

Obrázek 4 - Schéma testu ELISA (enzymová imunotest)

Citlivost testu ELISA je vyšší než 95%. Tato metoda se používá v automatickém režimu pro studium dekretiruemyh skupin: dárců, těhotné ženy a jiné pro potvrzení diagnózy s pozitivní a falešně pozitivních non-treponemálními testů.

Pro výzkumnou manipulaci často používáme krev z žíly. V určitých situacích může laboratorní technik vzít vzorek pro diagnózu z prstu nebo z míchy.

Interval od data doručení až po příjem výsledků může kolísat: od jednoho dne do dvou týdnů. Vše bude určeno typem testování.

Při přípravě na provedení krevní testy k identifikaci příslušné onemocnění je třeba dodržovat následující doporučení:

Zahájení vyšetřování těla k identifikaci dané nemoci vyplývá z nespecifických testů.

Ve většině případů lékař předepisuje MR. Dokonce i v případě, že výsledek slabě pozitivní ( „+“), pacient i nadále kontrolu - ale tentokrát to bude trvat specifické testy (často RIF a PHA).

Žádný test nemůže poskytnout 100% záruku, že osoba je infikována syfilisem.

Pozitivní analýza neznamená vždy nemoc.

To může být falešné s následujícími jevy:

  • Infekce těla (mononukleóza, tuberkulóza).
  • Těhotenství.
  • Onkozabolevanie.
  • Autoimunitní patologie.
  • Tato osoba byla předtím infikována syfilisem a podstoupila úspěšnou léčbu.

Posílá pacienty k analýze lékaře-venerologa. Soukromé laboratoře provádějí anonymní studie syfilisů na žádost klienta. Chcete-li absolvovat test, nepotřebují doporučení lékaře.

Pravidla výzkumu:

  • Laboratoř krve se odebere ráno na prázdný žaludek (jíst po proceduře). Před zkouškou je povoleno pouze pít vodu.
  • 2 dny před vyšetřením je zakázáno jíst mastné potraviny a konzumovat alkohol.
  • Krev se odebírá z prstu nebo žíly.
  • Jak dlouho trvá studie? Obvykle ne více než jeden den. Analýzu testů na syfilis získáte od laborantů nebo od ošetřujícího lékaře.
  • Kolik je test platný? Po 3 měsících nejsou výsledky testů platné. Odešle se znovu.

Pokud analýza ukazuje, že test je pozitivní, je třeba navštívit veterináře, který předepíše další vyšetření, aby přesně potvrdil diagnózu a zvolil potřebný léčebný režim.